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Millipore ZipTip微量层析柱你了解多少?
点击次数:836 发布时间:2020-12-28

Millipore ZipTip微量层析柱---为MALDI-ToF MS浓缩和纯化样品

概述

ZipTip的优点

  • 一步脱盐、浓缩和纯化
  • 分级分离复杂样品,以获得更有意义的数据
  • 适合肽、核酸和其他样品的理想工具
  • 无滞留体积,z大化回收
  • 省却了耗时的色谱分析

ZipTip是一种10 µL微量层析柱,配有0.6或0.2 µL色谱培养基柱床,固定于其末端,无滞留体积。是为了敏感的下游分析进行样品浓缩和纯化的理想工具。

下面是可以用ZipTip样品制备加以改善的一些分析举例:

  • 质谱
  • HPLC(高性能液相光谱)
  • 毛细管电泳
  • 原子吸收光谱

ZipTip微量层析柱简单易用。

  • 将微量层析柱装到单通道或多通道移液器、标准22口径钝端HPLC针、或兼容的自动移液/样品制备站上。
  • 吸取和分配培养基数次以进行样品结合。
  • 用类似方法,吸取和分配适当的清洗溶液,以去除污染物。
  • 将浓缩、纯化后的样品洗提到1–4 µL相容溶剂中,然后直接移液到质谱分析、小杯或其他分析步骤。

对于要求更小的洗提体积的应用(例如<1 µL),我们还提供含有0.2 µL培养基的微量柱床。

ZipTip微量层析柱为浓缩和纯化飞克摩尔至皮摩尔的肽、蛋白和寡核苷酸提供了再现性和回收率z越的方法,使分析数据更好。要想进一步简化分析,您还可以通过分步洗提来分级分离复杂的肽混合物。

性能

 

ziptip

有3种不同的ZipTip树脂可供选择:

树脂相容分析物
C18树脂(0.6 µL或0.2 µL柱床容积)寡核苷酸或小蛋白(<50 kDa)/肽水溶液
C4树脂蛋白或肽(3 kDa – 100 kDa)水溶液
强阳离子交换树脂(SCX)含有有机溶剂或除垢剂的肽溶液

ZipTip®微量层析柱是一种10 µL层析柱,配有0.6或0.2 µL色谱培养基柱床,固定于其末端。其特别适合为敏感的分析(例如MALDI-ToF MS)浓缩和纯化样品。ZipTip®微量层析柱为浓缩和纯化飞克摩尔至皮摩尔的肽、蛋白和寡核苷酸提供了再现性和回收率z越的方法,使分析数据更好。要想进一步简化分析,您还可以通过分步洗提来分级分离复杂的肽混合物。

规格

材料
微量层析柱聚丙烯
C18 和µ-C18 树脂硅珠,15 µm,200 Å孔径
C4树脂硅珠,15 µm,300 Å孔径
SCX树脂强阳离子交换树脂,12 µm,300 Å孔径
体积,µL
微量层析柱10 µL
树脂柱床0.2或0.6
容量
ZipTipC18当分析物达到饱和时,通常为5 µg
ZipTipµ-C18当分析物达到饱和时,通常为2.0 µg
ZipTipC4当分析物达到饱和时,通常为3.3 µg
尺寸
Tip 长度31 mm
Tip 内径 (顶)3.375 mm
Tip 外径 (顶)5.8 mm
温度4至70 °C
pH 范围pH1.5 – pH13.5;当24小时接触时,为pH2 – pH12

推荐的配套设备

手动移液:
ZipTip微量层析柱适配大多数10 µL单通道移液器。如要同时处理8个样品,建议使用Biohit Proline® 多通道电子移液器。
自动移液:
ZipTip微量层析柱还可配用多种自动移液系统,包括:

  • 用于Biospectrometry™ 的ABI SymBiot® 样品工作站(ABI货号:GEN602987),配有适合ZipTip微量层析柱通用锥尖和适合ZipTip盒子的支架适配器
  • 基因组溶液ProMS™ 样品制备站
  • Bruker Daltonics MAP™ II 和 II/8 MALDI AutoPrep系统,配有适合ZipTip盒子的支架适配器(密理博货号:ST0B DAP TR)
  • Tecan GENESIS工作站
  • CyBio CyBi™-96孔自动移液器

 脱盐步骤

(1)用50%ACN中性溶液活化Millipore C18 ZipTip. 吸排5~10次。
(2)用0.1% 甲酸溶液平衡C18 ZipTip。 吸排除5~ 10次。」
(3)用2 ul 0.1%甲酸溶解酶切产物,用C18 ZipTip 吸附肽段。吸排5~10次。
(4)用0.1%甲酸溶液洗盐。吸排2~3次。
(5)吸取4ul含0.1% 甲酸的50%ACN溶液洗脱肽段供质谱分析。在空样品管①中吸排5~10次。
(6)吸取4ul含0.1%甲酸的70%ACN溶液洗脱肽段供质谱分析。在空样品管②中吸排5~10次。
(7)用70%ACN中性溶液吸排5~10次,洗净ZipTip柱。

特别注意事项:样品中不应该含有机溶剂

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