赛多利斯超滤离心管
超滤
超滤是通过超滤膜实现的；这种膜具有方向异性，表现为表层致密，深层疏松的特点；根据超滤膜本身的孔径，可以分离相应的大分子和溶剂。在超滤的过程中，溶剂和盐类透过超滤膜，而大分子则因为被截留而得到浓缩。并且超滤还可以用来进行溶剂置换。通过多次的浓缩和添加目标溶剂，就可以逐步完成目标溶剂的替换，从而取代了冗长的透析步骤。尽管超滤并非分离/分馏不同大分子的标准方法，但在某些情况下仍可以运用，如不同大分子的分子量相差至少10倍以上。
超滤是一种温和的方法，不会引起大分子的变性，因此比其他的方法更加有效，适应面更广。
超滤的方法：
赛多利斯提供了各种各样的超滤方法，供您在浓缩生物学样品时使用。下面列举了超滤产品的选型指南，您可以结合样品体积，可用的设备，以及期望的超滤速度和过程控制等因素来选择适合的产品
－离心浓缩：
（处理体积：100ul-100ml）
过膜压力由离心力提供，在离心力的作用下，溶剂和小分子的物质将通过超滤膜，进入下游滤出液收集器中。这是一个温和的过程，可快速装配，并且比多数其他方法实现更快的过滤速度。
赛多利斯提供了多种产品，包括7种vivaspin®系列产品，2种vivacell®产品和1种centroSart®I,这些产品可用于蛋白浓缩，同时也有vivacon®系列产品用于DNA浓缩和多肽的浓缩与分离。
－加压超滤
（处理体积：5ml-250ml）
过膜压力过膜压力由压缩空气或压缩惰性气体提供。为了得到快的超滤效果，加压后的vivacell®产品可以放置在实验室摇床上。摇床的震荡，避免了大分子沉积在膜表面形成的浓差极化现象，从而维持了超滤流速。Vivaspin®20,Vivacell® 70, Vivacell® 100 and Vivacell® 250这四种产品可以带
压使用。
加压离心是赛多利斯*的超滤方式，该方式集合了加压超滤和离心超滤的优点，因此超滤的速度在所有方法中快。
通常，该方法比离心的方法要快30%-50%。Vivaspin®20和Vivacell®70可以进行加压离心的操作（初始体积：5-50ml）。
－切向流
（处理体积：100ml-5L）
在蠕动泵的作用下，样品流经超滤膜，又回流到样品容器中；在切向流设备的回流出口位置安装限流装置，以此提高超滤膜表面受到的压力；此时，超滤膜受到的切向压力就是过膜压力。在过膜压力的作用下，溶剂和小分子的物质穿过超滤膜进入到滤出液收集容器中。可重复使用的Vivaflow® 50R和
Vivaflow®200以及一次性使用的Vivaflow®50，是目前市面上专门为实验室应用而设计开发的切向流超滤膜包。
－静态吸附
（初始体积：3ml-20ml）
这种技术，是在超滤膜的后方填充强吸附性的纤维素，在这些纤维素的吸附作用下，溶剂和小分子的物质透过超滤膜被吸收，从而使被截留的大分子得到浓缩，并集中在了样品池的底部；在这里，纤维素的吸附力提供了过膜压力。这种方法不需要任何其他的设备，因此是临床应用的理想选择，例
如，在进一步分析之前，对尿液进行浓缩。静态吸附的产品有Vivapore®5和and Vivapore®20可供选择。
超滤的典型应用
- －浓缩/脱盐、适用于蛋白、酶类、DNA、单克隆抗体、免疫球蛋白、病毒和纳米颗粒
- －在毛细管电泳之前，对尿液中本周氏蛋白(Bence Jones Protein，BJP)进行浓缩
- －司法鉴定中，在链式反应之前，对DNA进行浓缩
- －基于滤膜的样品制备(filter-based sample preparation,FASP)-多肽的分离
- －游离型药物/激素的分析
- －从PCR扩增后的DNA中去除引物；
- －去除标记氨基酸和标记核苷酸
- －去除样品中的蛋白质
- －实验室常规的浓缩和脱盐、包括蛋白、酶类、DNA、生物分子、病毒、抗体和免疫球蛋白
Process Optimization
超滤过程的优化
某些情况下，必须追求zui高的回收率，例如，目标溶质处于微克级别，赛多利斯推荐您考虑如下措施来获得*的超滤效果：
- －根据目标分子量，选择尽量低的MWCO。为得到zui高的回收率，MWCO应至少在目标溶质分子量的一半以下；
- －避免过度浓缩。终体积越小，就越难以达到*的回收率。如果可行，在初浓缩之后，使用一滴或数滴缓冲液冲洗浓缩装置，再进行回收；
- -对超滤装置进行预处理；使用蒸馏水配制钝化溶液，例如5%的SDS,Tween 20 或Triton X,将超滤装置浸泡过夜，使用前*清洗即可使用。
