Western Blot实验作为普遍的一种蛋白研究方法之一，普遍应用于科研领域，本文重点介绍WB实验中常用的转印膜：PVDF与NC膜
• PVDF 转印膜：一种聚偏氟乙烯（ PVDF）微孔膜，用于从各种凝胶基质转移蛋白质，具有高强度、可重复剥离、高化学兼容性及结构均一稳定等优点。该系列转印膜对蛋白质有很高的结合能力，可提供优异的灵敏度和低的背景。
• NC转印膜：转印膜是纯的、无支持的硝酸纤维素微孔膜，用于从各种凝胶基质转移蛋白质和核酸类物质。该系列转印膜对蛋白质有较高的结合能力，可提供优异的灵敏度和低的背景。
WB是生物学研究中常用的蛋白质检测技术。
而转印膜作为WB的核心，其选择直接影响实验结果的成败。
许多小伙伴在做WB实验时，时常苦恼不知如何选择膜材质和膜孔径，今天上海必泰就跟大家唠唠其中的区别以及该如何选择。
两种膜材质有何区别？
| 区别 | PVDF膜 | NC膜 |
| 材料构成 | 由聚偏氟乙烯制成,更坚韧耐用， 蛋白结合能力更强 | 由硝酸纤维素制成，具有良好的 蛋白结合能力，但较脆，易破损 |
| 蛋白结合能力 | 结合能力高达170-200 μg/cm², 适合检测低丰度蛋 | 结合能力约为80-100μg/cm²,适 合检测中高丰度蛋白 |
| 灵敏度 | 灵敏度更高，尤其适合化学发光 (ECL)和荧光检测 | 灵敏度适中，适合常规检测 |
| 耐久性 | 耐化学性强，适合重复使用和长 时间保存 | 较脆弱，不适合长期保存或多次 剥离再检测 |
| 激活原理 | 需要甲醇或乙醇浸湿激活，激活后 用转膜缓冲液平衡，保持膜的活性， 确保后续转膜效果 | 具有亲水性，无需激活可直接使用 |
两种膜孔径如何选择？
选到合适材质的膜之后，还需要根据检测蛋白的大小，选择合适的膜孔径。
转印膜的膜孔径通常有两种大小:0.22μm和0.45μm。
| 0.22um孔径 | 0.45um孔径 |
特别适用于分子量小于20kDa的蛋白 可以有效减少小分子量蛋白的渗漏。 | 更加常用，特别适用于分 子量大于20kDa的蛋白。 |
PVDF转印膜
- 具有很高的机械强度，不易破裂或卷曲
- 具有背景低、溶剂相容性广，着色能力优异等优点
- 兼容丽春红、考马斯亮蓝染色剂、Syproruby等多种染料，适用于化学发光、常规显色、染色、同位素和荧光等方法进行检测
NC转印膜
- 具有良好的结合载量，且背景很低，但机械强度低于PVDF膜
- 兼容丽春红、酰胺黑等多种染料，适用于化学发光、常规显色、染色、同位素和荧光等方法进行检测
